|
|
Detekce platinových derivátů pomocí ICP hmotnostní spektrometrie
Zelinová, Karin ; Hložková, Michaela (oponent) ; Vašinová Galiová, Michaela (vedoucí práce)
Práce se zabývá sledováním prostupu chemoterapeutik do nádorových buněk. Vzhledem k toxicitě léčiv je z hlediska minimalizace zásahu do zdravé tkáně pacienta zcela zásadní jejich zacílení. Aby mohlo být co možná nejlepšího zacílení dosáhnuto, je nutné sledovat prostup chemoterapeutik do buněk. Předmětem studie byla léčiva na bázi platiny, pro sledování obsahu léčiva v buňkách byla proto vybrána metoda ICP-MS, která je vhodná pro rychlou a spolehlivou detekci stopového množství prvků. Teoretická část práce se zaměřuje na popis ICP-MS, jakožto metody, která byla pro detekci platinových derivátů zvolena. Dále pak shrnuje využití léčiv na bázi platiny při léčbě rakovinového onemocnění. Experimentální část je věnována analýze buněk vystavených působení chemoterapeutik na bázi platiny. Detekce a kvantifikace platiny v buňkách byla provedena pomocí LA-ICP-MS a SN-ICP-MS. Pro ověření výsledků byla analýza roztoku provedena rovněž metodou AAS. Z výsledků vyplývá, že nejochotněji bylo léčivo přijímáno buňkami buněčné linie A2780. Taktéž se ukázalo, že nejvíce kumulovaným léčivem byla cisplatina.
|
|
|
Studium interakce potenciálních léčiv na bázi metalocenů s buňkami
Bilavčíková, Kristýna ; Mravcová, Ludmila (oponent) ; Vašinová Galiová, Michaela (vedoucí práce)
V České republice bylo již k roku 2017 diagnostikováno téměř 600 tisíc onkologických pacientů a jejich počet stále roste. Dostupná a používaná chemoterapeutika mají ale řadu nežádoucích vedlejších účinků, a proto stále roste snaha o nalezení specifičtějšího a méně cytotoxického léčiva. V rámci této bakalářské práce byla studována potenciální léčiva na bázi metalocenů s centrálním atomem Ru, Hf nebo Zr, vždy ve třech různých strukturách od každého prvku. Byla studována prostupnost a distribuce těchto léčiv do buněčných linií karcinomu plic. Tato léčiva byla detekována analýzou průměrného složení a laserovou ablací ve spojení s ICP hmotnostním spektrometrem. Na základě provedeného experimentu byl zjištěn největší potenciál u léčiva 133 na bázi ruthenia, které mělo nejvyšší prostupnost a do buněk se dostávalo v největším obsahu.
|
|
|
Utilisation of fluorescence techniques for analysis of industrially relevant microorganisms
Müllerová, Lucie ; Kráčmar, Stanislav (oponent) ; Krčma, František (oponent) ; Obruča, Stanislav (vedoucí práce)
Single-cell analysis techniques are very important when studying relevant biotechnological microorganisms. In biotechnological processes, the optimum is to have fast, efficient and real-time analyses that can be done with minimal preparations. Therefore, we looked at autofluorescence as a possible and natural marker when employing fluorescence microscopy and flow cytometry. First, it has been established, based on the emission spectra, that the green autofluorescence of the bacteria used – Cupriavidus necator H16 and its non polyhydroxyalkanoates (PHA) producing mutant Cupriavidus necator PHB-4, is caused predominantly by flavins. The maxima of emission spectra were 510 – 550 nm for FAD, FMN and riboflavin whose spectra could not be distinguished, and 515 nm for both strains of Cupriavidus necator. Two maxima of excitation spectra of the bacteria were found – one in the range 360 – 370 nm and another around 440 nm, and so a new protocol for fluorescence microscopy has been established - the laser used was 467 nm and the emission filter chosen for the detection was 520/35 nm. Flavins and their autofluorescence can also be used in combination with other fluorophores when the need for multi-parametrical analyses arises, but it’s highly recommended the other dyes emit other than green fluorescence in the band of 500 – 550 nm or/and have an average fluorescence lifetime other than 3.2 – 3.7 and 4.2 - 4.9 ns. These values stayed constant even when the cells were exposed to various cultivation and even stress conditions. That makes them a very stable marker compared to the dynamic marker of fluorescence intensity that changes immediately after a change in the environment. A new staining protocol for C. necator using PHA-specific hydrophobic probe BODIPY 493/503 was optimised. The optimal staining concentration of the lipophilic dye BODIPY 493/503 was determined to be 2.5 µg ml-1 and it can be used in combination with propidium iodide. The BODIPY 493/503 staining protocol has been used when analysing the morphology of the PHA-synthesising bacteria Halomonas halophila. Further, to study the UV-protective properties of PHA in Cupriavidus necator, another staining essay has been optimised. It has been established that the ROS sensitive dye CM-H2DCFDA gives better performance than its non-methylated form. Also, the UV-protective characteristics of the PHA-synthesising strain Cupriavidus necator H16 were confirmed when compared to its non-PHA synthesising strain C. necator PHB-4.
|
|
|
Detekce platinových derivátů pomocí ICP hmotnostní spektrometrie
Zelinová, Karin ; Hložková, Michaela (oponent) ; Vašinová Galiová, Michaela (vedoucí práce)
Práce se zabývá sledováním prostupu chemoterapeutik do nádorových buněk. Vzhledem k toxicitě léčiv je z hlediska minimalizace zásahu do zdravé tkáně pacienta zcela zásadní jejich zacílení. Aby mohlo být co možná nejlepšího zacílení dosáhnuto, je nutné sledovat prostup chemoterapeutik do buněk. Předmětem studie byla léčiva na bázi platiny, pro sledování obsahu léčiva v buňkách byla proto vybrána metoda ICP-MS, která je vhodná pro rychlou a spolehlivou detekci stopového množství prvků. Teoretická část práce se zaměřuje na popis ICP-MS, jakožto metody, která byla pro detekci platinových derivátů zvolena. Dále pak shrnuje využití léčiv na bázi platiny při léčbě rakovinového onemocnění. Experimentální část je věnována analýze buněk vystavených působení chemoterapeutik na bázi platiny. Detekce a kvantifikace platiny v buňkách byla provedena pomocí LA-ICP-MS a SN-ICP-MS. Pro ověření výsledků byla analýza roztoku provedena rovněž metodou AAS. Z výsledků vyplývá, že nejochotněji bylo léčivo přijímáno buňkami buněčné linie A2780. Taktéž se ukázalo, že nejvíce kumulovaným léčivem byla cisplatina.
|
|
|
Studium interakce potenciálních léčiv na bázi metalocenů s buňkami
Bilavčíková, Kristýna ; Mravcová, Ludmila (oponent) ; Vašinová Galiová, Michaela (vedoucí práce)
V České republice bylo již k roku 2017 diagnostikováno téměř 600 tisíc onkologických pacientů a jejich počet stále roste. Dostupná a používaná chemoterapeutika mají ale řadu nežádoucích vedlejších účinků, a proto stále roste snaha o nalezení specifičtějšího a méně cytotoxického léčiva. V rámci této bakalářské práce byla studována potenciální léčiva na bázi metalocenů s centrálním atomem Ru, Hf nebo Zr, vždy ve třech různých strukturách od každého prvku. Byla studována prostupnost a distribuce těchto léčiv do buněčných linií karcinomu plic. Tato léčiva byla detekována analýzou průměrného složení a laserovou ablací ve spojení s ICP hmotnostním spektrometrem. Na základě provedeného experimentu byl zjištěn největší potenciál u léčiva 133 na bázi ruthenia, které mělo nejvyšší prostupnost a do buněk se dostávalo v největším obsahu.
|
|
| |
|
|
Sample preparation for single cell analysis
Adamová, Eva ; Basova, E. Y. ; Potáčová, Anna ; Foret, František ; Matalová, Eva ; Klepárník, Karel
Development of sensitive, miniaturized and fast methods aims to reliable analyze even small amounts of samples. Micromanipulation systems such as laser capture microdissection enable to collect just single cells from cell suspensions or tissue samples. One option for further analysis is the bioluminescence reaction based on luciferin/luciferase conversion. This approach was used for detection of active caspases, caspase-3/7. Droplets based microfluidic systems provide benefits in biological, pharmaceutical and chemical research.
|
|
| |
host ::
RSS.